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Real-time PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

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实时定量PCR引物设计，由经验丰富的专家设计，成功率高达99%

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1.miRNA提取。2.利用加尾法将RNA逆转录成cDNA。3.随机选择一个样品进行预实验,筛选引物,优化程序。4.荧光定量PCR正式试验。5.提交报告,原始Ct值。

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单细胞RT-PCR技术创立于1991年，随着时间发展，其技术不断完善，在神经生物学、胚胎发育、免疫学等领域都有进一步发展。

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